急性心肌梗死大鼠心肌基因表达谱构建、鉴定及功能基因的研究

？目的:构建急性心肌梗死(acutemyocardialinfarction,ami)大鼠缺血心肌基因表达谱,对筛选出的目标基因进行功能研究.方法:结扎wistar大鼠冠状动脉左前降支建立ami模型,饲养7d处死,提取正常和缺血心肌总rna,应用长标签基因表达系列分析(longserialanalysisofgeneexpression,longsage)方法,构建ami后大鼠缺血心肌基因差异表达谱,运用荧光定量pcr技术验证差异基因表达谱的可靠性,同时应用该技术定量两个功能基因的表达.生化法检测功能基因所表达的蛋白酶活性.结果:在建立的ami后缺血心肌和正常心肌组织longsage标签库中,共获得标签15966个,对照ncbi网站blast结果,发现新核苷酸序列标签7665个.与正常组比较,142个基因在ami大鼠心肌组织中的表达差异有统计学意义(p<0.05),这些差异基因主要与氧化磷酸化、三磷酸腺苷(atp)合成、糖异生等能量代谢通路相关.荧光定量pcr的鉴定结果与longsage差异表达结果基本一致.筛选能量代谢相关基因cox5a、atp5e作为研究目标,荧光定量pcr结果提示2个基因在rna水平表达下调;与之平行对应的功能蛋白酶的活性也相应降低.结论:ami可引起多基因表达异常,能量代谢作用通路相关基因的异常表达可能是造成ami心肌损伤的重要分子机制之一,干预cox5a和atp5e等功能基因的表达可能是ami能量代谢治疗的新靶点.