人骨髓间充质干细胞体外分化为雪旺样细胞的方法

？目的:建立人骨髓间充质干细胞体外向雪旺样细胞定向诱导分化的方法.方法:取健康人骨髓血标本,利用percoll(密度为1.073g*ml-1)分离骨髓单个核细胞,在dmem-lg+10%(体积分数)fbs中培养,通过流式细胞术对培养细胞进行表型测定,对第2、3、5、8代间充质干细胞进行定向诱导分化,用单抗s-100、神经胶质纤维酸性蛋白(glialfibrillargacidicprotein,gfap),通过免疫组化方法对诱导的细胞进行鉴定.结果:经percoll分离的间充质干细胞可传16代,细胞数增加了大约6×107倍.流式细胞术结果显示:percoll分离出来的未经培养的细胞,其cd29+cd44+cd34-cd45-细胞数为32.47%±3.49%,而培养后贴壁细胞中cd29+cd44+cd34-cd45-细胞数为94.38%±1.50%.诱导后免疫组化染色结果显示:由β-me+bfgf预诱导、β-me+bfgf诱导的s-100阳性细胞最多,可达90%±4%,gfap阳性细胞为21%±5%.结论:人骨髓中间充质干细胞能定向诱导分化成雪旺样细胞.