ⅱ型胶原变构肽鼻黏膜给药治疗胶原诱导性关节炎的实验研究

？目的:研究以丙氨酸替换ⅱ型胶原(collagenⅱ,cⅱ)263-272序列中的267、270、271位氨基酸的变构肽鼻黏膜给药对胶原诱导性关节炎(collageninducedarthritis,cia)的抑制作用及其作用机制.方法:以牛cⅱ免疫lewis大鼠诱发cia.于发病的当天开始给予cⅱ变构肽和原型肽鼻滴入治疗,连续每天给药,5d后,改为隔天给药,空白对照组给予磷酸盐缓冲液(phosphatebufferedsolution,pbs).观察关节肿胀情况,记录关节炎评分以及体重的改变.治疗结束后处死大鼠,行后踝关节病理切片,观察关节病理改变.elisa方法检测血清巾抗cⅱ抗体亚型以及细胞因子的变化,流式细胞仪检测外周血cd4+cd25+t细胞的变化,荧光定量pcr检测脾和淋巴结中foxp3和tgf-βmrna的表达水平.结果:(1)cⅱ变构肽可以抑制cia的发展.实验结束时cⅱ变构肽、原型肽以及pbs组大鼠关节炎评分分别为2.50±2.43、4.50±2.23和6.33±2.73(变构肽治疗组与pbs对照组比较,p<0.05),各组大鼠后踝关节病理学评分分别为1.33±1.07、2.17±0.94和2.83±0.58,与pbs对照组相比,cⅱ变构肽可以明显抑制cia关节病变的发展(p<0.05).(2)与pbs对照组相比,cⅱ变构肽可以降低cia大鼠体内抗cⅱ抗体igg2a亚型的滴度(0.56±0.19和0.95±0.29,p<0.05).cⅱ变构肽、原型肽及pbs对照组大鼠血清中γ干扰素(interferon-γ,ifn-γ)水平分别为(185.33±29.77)、(231.62±41.82)和(220.64±83.61)ng/l,与原型肽组相比,cⅱ变构肽可以降低大鼠血清中ifn-γ水平.(3)cⅱ变构肽治疗对调节性t细胞的影响:3组大鼠外周血cim+cd25+t细胞占cd4+t细胞比例差异无统计学意义,cⅱ变构肽治疗组大鼠脾和淋巴结中foxp3和转化生长因子b(transforminggrowthfactorsβ,tgf-β)mrna的表达水平较对照组有升高趋势,但差异无统计学意义.结论:cⅱ变构肽鼻黏膜给药治疗可以抑制cia的发展,cⅱ变构肽可能主要通过抑制cia大鼠体内igg2a型抗cⅱ抗体的产生,并降低血清中ifn-ⅱ,从而抑制th1型免疫反应而发挥治疗作用.