pik3ip1与其新剪切体pik3ip1-v1均定位于细胞膜并诱导细胞凋亡

？目的:发现和克隆人类基因pik3ip1的新变异体并鉴定其功能,研究其对细胞活力的影响和亚细胞定位,分析pik3ip1在细胞系中的表达情况.方法:利用genbank中的数据,从人的混合组织cdna中通过pcr克隆pik3ip1和它的新剪切体pik3ip1-v1,运用生物信息学分析其结构特性.经萤光素酶活性检测、细胞形态观察和流式细胞检测研究pik3ip1和pik31p1-v1对细胞存活力的影响,使用荧光显微镜观察其亚细胞定位.最后通过rt-pcr分析pik3ip1在细胞系中的表达情况.结果:获得pik3ip1和新剪切体pik3ip1-v1的真核表达质粒和融合绿色荧光蛋白表达质粒.生物信息学分析显示,pik3ip1和pik3ip1-v1均有信号肽并包含跨膜结构域,但后者胞外缺失一个kringle结构域.功能分析发现,pik3ip1和pik3ip1-v1均可诱导细胞凋亡.荧光显微观察证实,pik3ip1的两种剪切体均定位于细胞膜.rt-pcr证明pik3ip1在多种细胞中转录水平较低.结论:新剪切体pik3ip1-v1和pik3ip1均定位于细胞膜并诱导细胞凋亡,而且在多种细胞中低水平转录.