富血小板纤维蛋白对犬牙髓细胞的体外作用

？目的：检测比格犬静脉血制取的富血小板纤维蛋白（platelet-richfibrin，prf）对自体牙髓细胞（caninedentalpulpcells，cdpcs）增殖和趋化的作用，探讨prf作为自体来源生物材料在临床活髓治疗中应用的可行性。方法：用酶消化法分离培养cdpcs；用choukroun一步离心法制取prf，将其浸泡于纯净的最小必需培养基α（minimumessentialmediumalphamedium，α-mem）中，于第7天取浸出液，即为prf浸出液。细胞增殖作用采用细胞计数试剂盒-8（cellcountingkit-8，cck-8）检测，对照组为含2%（体积分数）胎牛血清（fetalbovineserum，fbs）的α-mem培养基，实验组为含2%fbs的prf浸出液，并按prf浸出液浓度（体积分数）分为20%、40%、60%、80%、100%共5组，分别记为prf1、prf2、prf3、prf4、prf5。趋化实验采用transwell模型，实验组prf浸出液浓度选择对增殖促进作用最显著的浓度，阴性对照组为不含fbs的α-mem培养基，阳性对照组为含30%（体积分数）fbs的α-mem培养基，各组上室均接种1×105个细胞。结果：prf2组的光密度值(1.45±0.06)显著高于对照组（1.21±0.11），差异具有统计学意义（p＜0.001），prf1组、prf3组、prf4组、prf5组光密度值分别为1.20±0.02、1.28±0.04、1.19±0.02、1.22±0.02，与对照组差异无统计学意义（p值分别为0.902、0.084、0.726、0.779），即40%浓度的prf浸出液对自体cdpcs的增殖具有显著的促进作用，在该浓度下，prf组细胞迁移数目为55.89±18.42，与阴性对照组（6.52±1.97）比较差异具有统计学意义（p＜0.001），而与阳性对照组（59.25±29.17）差异无统计学意义（p=0.970）。结论：prf与cdpcs有良好的生物相容性，40%浓度的prf浸出液可促进cdpcs的增殖、趋化作用，提示prf可作为活髓治疗中牙髓修复的盖髓材料使用。