大鼠在体钙化心血管和离体钙化平滑肌细胞模型的制备

？目的:应用药理学方法建立在体大鼠的心血管钙化模型和体外培养的大鼠血管平滑肌细胞(vsmc)钙化模型.方法:每日8时给予大鼠肌注维生素d3(300000u/kg体重)和尼古丁(25mg/kg体重,混入花生油2ml中)灌胃,18时再灌胃1次.对照组动物肌注生理盐水和单纯花生油灌胃,方法同钙化组.两组动物以相同饲料饲养4周后进行心功能指标检测.取动脉血检测钙含量,并摘取心脏和主动脉血管称重,用vonkossa染色方法检测钙沉积.培养的大鼠胸主动脉平滑肌细胞用β-磷酸甘油丙酮酸钠处理,培养14天后收集,检测钙含量并用vonkossa染色方法检测钙沉积.结果:维生素d3和尼古丁诱导的心血管组织钙化大鼠(vdn组大鼠)体重比对照组轻(p＜0.01),左心室重与体重比值高(p＜0.01),血浆钙水平差异无统计学意义(p＞0.05),但心肌和主动脉钙含量均高于对照组(p＜0.01);心肌和主动脉碱性磷酸酶活性也高于对照组(p＜0.05和p＜0.01);vdn组大鼠vonkossa染色见心脏血管组织有大量钙盐的沉积.vdn大鼠平均动脉压(mbp)、心率(hr)和左心室舒张末期压(lvedp)并无明显变化(p＞0.05),左心室内压变化速率即+lvdp/dtmax和-lvdp/dtmax均较对照组低(p＜0.05和p＜0.01).体外培养诱导钙化vsmc与对照相比较,钙化vsmc用vonkossa染色见有大量棕黑色颗粒沉积,钙化vsmc的钙含量、45ca2+摄入及碱性磷酸酶活性均增加(p＜0.01).结论:用药理学方法于在体和离体水平均可以建立简便、经济、可靠、稳定、重现性好的钙化模型.