体外贮存对人富血小板血浆生物学活性的影响

？目的:探索各种贮存条件对人富血小板血浆(humanplatelet-richplasma,hprp)生物学活性的影响,研究hprp释放生长因子的浓度作为评价hprp生物学活性指标的可行性,为最终确定一整套应用hprp的标准化方法奠定基础.方法:制备健康志愿者的hprp,记录血小板计数.将每份hprp释放生长因子分为3组,分别贮存在4℃,-20℃和-70℃,在制备后0,2,4,6,8,10d测定3组标本中转化生长因子β1(transforminggrowthfactorβ1,tgf-β1)和血小板衍生生长因子ab(platelet-derivedgrowthfactorab,pdgf-ab)的浓度.同时,应用不同温度(4℃,-20℃,-70℃)贮存10d的hprp释放生长因子培养人脂肪基质细胞,以mtt法比较各组标本促进细胞增殖的生物学活性.结果:在体外贮存过程中,hprp释放生长因子tgf-β1和pdgf-ab的浓度下降很快.低温是保存hprp释放生长因子相对适宜的环境.当贮存10d后,在-20℃和-70℃贮存的标本其tgf-β1的浓度分别为(238.55±36.00)μg/l和(261.12±55.10)μg/l,pdgf-ab的浓度分别为(46.03±17.67)μg/l和(50.78±18.70)μg/l,显著高于贮存在4℃时两种生长因子的浓度[(113.03±16.29)μg/l和(23.27±8.22)μg/l(p＜0.01)].mtt实验结果显示,不同温度贮存hprp,其生物学活性也有显著差异,且与生长因子浓度差异基本一致.结论:hprp释放生长因子只能在低温环境中短时间贮存,生长因子定量分析是评价hprp生物学活性较为可靠的指标.