自然沉降法分离抗凝全血建立生物样本库的特点

？目的：评估用自然沉降法分离edta抗凝外周静脉全血（抗凝全血）建立血浆、白细胞、基因组dna生物样本库的特点。方法：采集符合纳入标准的29名志愿者抗凝全血，进行血常规检测作为对照组；然后将抗凝全血分装到4支ep管中，每支1ml，分为0.5、1、2、3h？4个试验组，于室温静置自然沉降0.5、1、2、3h后吸取血浆层，测量其体积，检测血浆层中白细胞总数及中性粒细胞、淋巴细胞的百分比；将含有白细胞的血浆层离心后，分装为无细胞血浆管和白细胞沉淀管，用部分白细胞提取dna,建立血浆、白细胞、dna3种生物样本库。结果：0.5h组血浆体积（241.72±101.52）μl显著低于1h组（317.24±97.50）μl、2h组（371.03±91.66）μl和3h组（408.97±97.43）μl，p<0.05。1h组血浆体积显著低于2h组和3h组，p<0.05；2h组显著低于3h组，p<0.05。0.5h组白细胞总数［（2.50×106）±（1.48×106）］显著高于2h组［(1.47×106)±(7.19×105)］和3h组［(1.21×106)±(7.41×105)］的白细胞总数，p<0.05，与1h组［(2.29×106)±(1.17×106)］比较差异无统计学意义，p>0.05；1h组显著高于2h和3h组，p<0.05；2h组与3h组差异无统计学意义，p>0.05。4个试验组白细胞总数均显著低于对照组。中性粒细胞百分比：0.5h组（54.14%±11.65%）显著高于1、2、3h组（46.66%±12.70%，39.17%±12.33%，43.25%±14.54%），p<0.05，显著低于对照组(60.53%±8.46%)，p<0.05；1h组显著高于2h组，p>0.05;1h组与3h组比较差异无统计学意义，p>0.05；3h组与1h、2h组比较差异无统计学意义，p>0.05。淋巴细胞百分比：0.5h组（35.09%±10.84%）显著低于1、2、3h组（41.48%±12.20%、47.96%±12.27%、45.50%±13.71%），显著高于对照组（30.98%±7.33%），p<0.05；1h组显著高于对照组、0.5h组，显著低于2h、3h组，p<0.05；2h组显著高于对照组、0.5h、1h组，p<0.05，与3h组之间差异无统计学意义，p>0.05。结论：？抗凝全血自然沉降法是一种无化学试剂干扰、低物理因素影响、低消耗、操作简单的分离白细胞血浆层的方法；0.5~1h是抗凝全血自然沉降获取含白细胞血浆层的最佳时间段；利用一份抗凝全血可以分离出血浆、白细胞和dna3种生物样本，建立3种生物样本库。