大鼠肝移植自发免疫耐受模型cd4+cd25+和cd8+cd28-调节性t细胞的变化

？目的:比较cd8+cd28-,cd4+cd25+调节性t细胞(tregulatorycells,treg)及其亚群表型在大鼠自发免疫耐受形成中的变化,并探讨其在肝移植免疫耐受形成中的作用.方法:(1)建立雄性brownnorway近交系大鼠(简称bn)到lewis近交系大鼠(简称lew)原位肝移植免疫耐受模型(存活＞120d),取同周龄lew大鼠作为对照组,应用梯度离心法分离外周血及脾单个核细胞,应用流式细胞仪检测cd8+cd28-,cd4+cd25+t细胞亚群比例;(2)应用免疫磁珠分离方法,通过间接法阴性分选和直接法阳性分选两步分离纯化cd8+cd28-,cd4+cd25+t细胞,并对其亚型表型进行检测,比较它们在移植耐受前后的差别.结果:(1)耐受组大鼠外周血及脾单个核细胞中cd8+cd28-,cd4+cd25+调节性t细胞的比例同对照组比较:cd8+cd28-t细胞增高,外周血为(30.2±5.8)%比(16.4±6.1)%,脾为(23.7±7.2)%比(13.4±5.5)%,p＜0.01;cd4+cd25+t细胞无明显差别,外周血为(9.9±3.5)%比(10.4±4.2)%,脾为(15.1±3.7)%比(14.7±4.6)%,p＞0.05.(2)cd8+cd28-,cd4+cd25+t细胞的亚型表型检测,①cd8+cd28-t细胞:耐受组为cd152(ctl-4)-,cd11b+,cd25-,cd45ro+;对照组为cd152(ctl-4)-,cd11b+,cd25-,cd45ro部分表达(76%);②cd4+cd25+t细胞:耐受组为cd152(ctl-4)+,cd11b+,cd28+,cd45ro+;对照组为cd152(ctl-4)+,cd11b+,cd28+,cd45ro+.结论:cd8+cd28-treg细胞在耐受组大鼠外周血及脾单个核细胞中的比例明显增高,而cd4+cd25+treg细胞则无明显改变,提示cd8+cd28-treg细胞在大鼠肝移植自发耐受的形成中的作用可能更为重要;cd152(ctl-4)在两种treg细胞表达差别可能是引起它们作用及表现不同的重要原因;黏附分子cd11b可能同两种treg细胞的功能均密切相关;cd8+cd28-treg细胞包含着不同亚群,而cd45ro表达的增加可能同cd8+cd28-treg细胞发挥抑制功能密切相关.