阻断电压依赖性钾通道1.3对人单核细胞源性巨噬细胞向泡沫细胞分化的抑制作用

？目的:研究人单核细胞源性巨噬细胞向泡沫细胞分化过程中,电压依赖性钾通道1.3(voltage-dependentpotassiumchannel1.3,kv1.3)mrna和蛋白的表达及作用.方法:采用密度梯度离心加贴壁黏附法,从男性健康志愿者的外周血中分离单核细胞,经5d培养后分化为巨噬细胞.在建立人巨噬细胞源性泡沫细胞模型的基础上,采用免疫细胞化学染色法、逆转录聚合酶链反应(transcription-polymerasechainraction,rt-pcr)及westernblot,研究kv1.3通道的表达,并观察其特异性阻断剂--rmargatoxin对摄取氧化修饰低密度脂蛋白(oxldl)的巨噬细胞胆固醇代谢的影响.结果:将巨噬细胞同30mg/loxldl于37℃孵育60h后,细胞体积增大,并有许多红色的脂质颗粒沉积于细胞质内,细胞内的总胆固醇(tc)、游离胆固醇(fc)及胆固醇酯(ce)的含量均显著增加,ce/tc从(14.4±6.8)%提高到(57.9±3.5)%(n=7,p＜0.05);而kv1.3通道mrna及蛋白的表达水平没有明显改变.0.1nmol/l和10nmol/l的rmargatoxin能显著减少巨噬细胞内tc、fc及ce的含量,ce/tc分别降至(42.8±11.6)%和(22.6±8.0)%(n=7,p＜o.05),细胞内沉积的红色脂质颗粒也明显减少.结论:人单核细胞源性巨噬细胞向泡沫细胞分化过程中,kv1.3通道的表达无明显改变.特异性阻断kv1.3能防止泡沫细胞形成.