何首乌中大黄素-8-o-β-d-葡萄糖苷的分离纯化与体外抗癌活性研究

？目的：？分离提取何首乌r50组分中的抗癌活性成分并进一步研究其抗癌作用机制。方法：利用sephadex？lh-20、tlc色谱法、反向硅胶色谱分离系统对何首乌r50组分进行分离纯化，获得大黄素-8-o-β-d-葡萄糖苷，利用tlc和高效液相色谱法(hplc)鉴定其纯度；mtt法检测大黄素-8-o-β-d-葡萄糖苷对人肝癌细胞hepg2、永生化人肝实质细胞l02、人结直肠癌细胞ht29和hct116、人神经母细胞瘤细胞sh-sy5y和人肺癌细胞a549的细胞毒作用；giemsa染色观察药物作用后hepg2细胞和l02细胞的形态变化；流式细胞术检测大黄素-8-o-β-d-葡萄糖苷对hepg2细胞和l02细胞周期和凋亡的影响。结果：从何首乌r50组分获得大黄素-8-o-β-d-葡萄糖苷，纯度为96%；大黄素-8-o-β-d-葡萄糖苷对hepg2、ht29和sh-sy5y细胞均有较显著的细胞毒活性(p<0.05)，且对hepg2、ht29细胞的作用表现出剂量效应(r=0.987，p=0.002；r=0.992，p=0.008)，而对l02、hct116、a549细胞无明显的细胞毒作用；200？μg/ml大黄素-8-o-β-d-葡萄糖苷作用hepg2细胞72？h，细胞生长受到抑制，并出现细胞核碎裂等凋亡细胞特征，l02细胞形态正常；大黄素-8-o-β-d-葡萄糖苷可诱导hepg2细胞发生g2~m期阻滞及凋亡。结论：大黄素-8-o-β-d-葡萄糖苷是何首乌r50组分中具抗癌活性的成分之一，其对永生化人肝实质细胞低毒，对人肝癌细胞有显著抑制作用，其作用机制与阻滞癌细胞周期和诱导细胞凋亡有关。