pp2ab56α亚基介导镉诱导的细胞毒性

？目的：探讨蛋白磷酸酶2a(pp2a)b56α亚基在调控cdcl2诱导的细胞毒性中的作用及其机制。方法：利用病毒感染法在人胚肾上皮细胞hek上构建pp2ab56α表达降低的细胞株模型(hek-shb56α-1和hek-shb56α-2)，采用改良四甲基偶氮唑盐(mtt)法检测cdcl2诱导的细胞毒性。用不同浓度(0、10、20、40和80μmol/l)cdcl2联合或不联合c-jun氨基末端激酶(jnk)抑制剂sp600125染毒细胞不同时间(0、2、6、12和24h)，采用免疫印迹检测b56α亚基、金属硫蛋白(mt)的表达和jnk的磷酸化水平。结果：免疫印迹结果证实细胞株hek-shb56α-1和hek-shb56α-2构建成功。与对照组比较，pp2ab56α表达抑制导致镉诱导的细胞毒性减小，jnk的磷酸化水平和mt的表达水平均显著增加。用不同剂量cdcl2处理细胞株12h，发现b56α表达抑制导致jnk磷酸化(p-jnk)分别增加了2.78和1.26倍(p<0.05)，mt的表达也分别增加了1.36和1.19倍(p<0.05)。用p-jnk抑制剂sp600125作用时，p-jnk的表达降低了35%~38%(p<0.05)，mt的表达下降了13%~35%(p<0.05)，cdcl2诱导的细胞毒性显著增加(p<0.05)。此外，用cdcl2处理细胞不同时间点，b56α的表达逐渐降低(p<0.05)，而p-jnk和mt的表达水平呈逐渐增加趋势(p<0.05)。结论：pp2ab56α在调控cdcl2诱导的细胞毒性中起着重要作用，其作用机制可能通过介导jnk的去磷酸化调控mt的表达而发挥作用。本研究揭示了pp2a参与重金属应激的关键靶点和信号通路的调控。