毛细管电泳法检测耐米托蒽醌乳腺癌细胞系全基因组甲基化水平
Keywords: 毛细管电泳,dna甲基化,mcf-7细胞,流式细胞术
Abstract:
？目的：建立对米托蒽醌(mit)耐药的乳腺癌mcf-7细胞系，并探讨乳腺癌细胞产生耐药与其基因组甲基化水平之间的关系。方法：用0.005、0.010和0.020μmol/l浓度的米托蒽醌染毒乳腺癌mcf-7细胞，建立对米托蒽醌不同耐药程度的mcf-7耐药细胞系，采用流式细胞术检测各染毒组mcf-7细胞内药物荧光强度d(755)值，确定mit耐药细胞系的建立；提取各组细胞的dna，利用毛细管电泳法检测野生型对照组及各染毒组细胞全基因组dna甲基化水平。结果：野生型对照组、0.005、0.010和0.020μmol/l米托蒽醌染毒组的d(755)值依次为16.1±0.04、14.3±0.12、13.3±0.07和9.7±0.08，与野生型对照组相比，随着药物染毒浓度的增加，mcf-7细胞内药物的d(755)值逐渐减少，其中0.020μmol/l染毒组较对照组显著减少，差异有统计学意义(p<0.05)，表明细胞耐药性增强；而上述各组dna甲基化水平依次为42.25%±0.64%、37.97%±1.18%、34.27%±0.14%、31.16%±0.80%，与野生型对照组相比，各染毒组细胞基因组dna甲基化水平逐渐降低(p<0.05)，且各染毒组间两两比较差异均具有统计学意义(p均<0.05)。结论：成功建立了对mit耐药的mcf-7细胞系；确定了毛细管电泳法检测基因组dna甲基化水平的电泳分离条件。
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