环孢霉素a对葡萄糖氧化酶诱导的hepg2线粒体功能损伤和细胞凋亡的保护作用

？？目的：？探讨环孢霉素a(csa)对葡萄糖氧化酶(gox)诱导的肝细胞线粒体功能损伤和细胞凋亡的影响。方法：hepg2细胞分别给予不同浓度的gox和csa处理，mtt法检测细胞活力，确定所要选用的剂量和时间点。以10？μmol/l的csa预处理？2？h，并给予25？u/l？gox处理12？h作为csa+gox组，同时设立空白对照组、gox阳性对照组、csa阴性对照组。分别采用annexinv/pi双染色结合流式细胞术检测细胞凋亡率；genmed活体细胞线粒体膜通道孔荧光试剂盒检测线粒体膜通透性转换；jc-1染色激光共聚焦检测线粒体膜电位变化；atp检测试剂盒检测细胞内atp水平；液相氧电极法检测线粒体耗氧量。结果：mtt结果显示gox能诱导hepg2细胞活力下降，且呈现时间和剂量效应关系(p均<0.05)；与空白对照组比较，25？u/l？gox作用12？h可诱导hepg2细胞凋亡，同时伴有线粒体膜通道开放和膜电位下降，细胞内atp水平和线粒体耗氧量下降(p均<0.05)，而10μmol/l的csa预处理2？h有一定的保护作用，可以有效阻断线粒体结构功能的损伤，降低凋亡率，csa+gox组与gox阳性对照组比较差异均具有统计学意义(p均<0.05)。结论：csa对氧化应激诱导的肝细胞线粒体功能损伤和凋亡具有保护作用。