α4在化学致癌物诱导细胞转化中的作用

？？目的：？探讨α4在化学致癌物诱导细胞转化中的可能作用。方法：采用免疫印迹检测化学致癌物诱导既往转化细胞模型和肝肿瘤细胞株中α4的表达水平，再利用病毒感染法在肝永生化细胞株l02r上构建α4高表达(l02r-α4)和低表达(l02r-shα4)的细胞株，检测其细胞生长速度和转化能力。进一步选择已建立的细胞株、化学致癌物afb1诱导转化的细胞(l02rt-afb1)及肝肿瘤细胞株hepg2和smmc等，在有或无mtor通路抑制剂雷帕霉素处理下，通过免疫印迹检测mtor下游两个分子p70s6k1和4e-bp1的表达及磷酸化水平。结果：在化学致癌物诱导转化的细胞模型和肝肿瘤细胞株中发现α4的表达比对照细胞上调1.9~5.9倍。蛋白印迹结果证实l02r-α4和l02r-shα4细胞株构建成功，α4表达上调能够促进l02r细胞增殖并发生转化(p＜0.05)。在α4高表达的转化细胞l02r-α4中，p70s6k1和4e-bp1呈高磷酸化状态。当有雷帕霉素作用时，所有细胞中p70s6k1和4e-bp1的磷酸化水平明显下降，在l02r-shα4细胞中下降尤为显著。结论：α4具有癌基因功能，α4的异常上调激活mtor通路，促进细胞增殖并诱导细胞恶性转化。