下调prps2基因表达对hct116细胞增殖和凋亡的影响

？目的:探讨下调磷酸核糖焦磷酸合成酶亚基ii(prps2)基因表达对人结肠癌hct116细胞增殖和凋亡的影响。方法:构建prps2基因干扰载体sh-prps2,正常对照组不转染载体,阴性对照组转染阴性对照载体sh-prps2-0,3个实验组分别转染干扰载体sh-prps2-1、sh-prps2-2和sh-prps2-3,经dna测序鉴定后转染人结肠癌hct116细胞,分别采用rt-pcr和westernblot法检测各载体转染后细胞prps2mrna和蛋白水平的表达变化,cck8试剂盒检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞周期及凋亡的变化。结果:经dna测序证实成功构建sh-prps2干扰载体3个,分别为sh-prps2-1、sh-prps2-2和sh-prps2-3。将上述3个干扰载体分别转染hct116细胞72h后,rt-pcr结果显示,prps2mrna相对表达量依次为0.61±0.03、0.89±0.02、0.27±0.05,与对照组比较,均显著下降(p<0.05)。westernblot结果显示,prps2蛋白相对表达量依次为0.37±0.06、0.84±0.05、0.30±0.04,与对照组比较均显著下降(p<0.05)。转染sh-prps2-3载体72h后细胞增殖抑制率达19.8%±2.4%,凋亡率上升至68.4%±4.6%,g0/g1期细胞比例上升为12.9%±3.8%。结论:prps2的低表达可以有效抑制细胞增殖,促进细胞凋亡,细胞阻滞于g0/g1期,本研究为肿瘤的靶向治疗提供了研究基础。