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癌变·畸变·突变 2009
喹乙醇诱导hepg2细胞线粒体的氧化损伤Keywords: 喹乙醇,线粒体,活性氧,线粒体膜电位,钙离子 Abstract: ?背景与目的:探讨喹乙醇(olaquindox)对人肝癌细胞(hepg2)线粒体的氧化损伤作用。材料与方法:用0、200、400和800μg/ml喹乙醇处理hepg2细胞24h后,采用噻唑蓝(mtt)法确定喹乙醇对hepg2细胞的ic50;分子探针2',7'-二氯荧光黄双乙酸盐(2',7'-dichlorodihydrofluoresceindiacetate,dcfda)和双氢溴乙啶(dihydroethidium,dhe)检测细胞内活性氧(reactiveoxygenspecies,ros)含量;罗丹明123检测线粒体膜电位(△ψm)变化;钙离子荧光探针fluo-3am检测胞浆游离钙离子浓度并用定量pcr方法检测线粒体dna(mtdna)和核dna(ndna)的损伤情况。结果:随着喹乙醇浓度的增加,hepg2细胞的存活率逐渐降低(p均<0.01),呈时间-剂量-反应关系;不同浓度的喹乙醇作用细胞24h后,随着喹乙醇浓度的增加细胞内ros和胞浆游离钙离子浓度显著增加(p<0.05或p<0.01),△ψm明显降低且呈剂量-反应关系;喹乙醇能引起hepg2细胞mtdna和ndna损伤(p均<0.01),且mtdna损伤程度显著高于ndna,并呈剂量-反应关系。结论:喹乙醇在体外实验中,可诱导hepg2细胞线粒体氧化性损伤。
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