泛素连接酶ring2对苯并[a]芘染毒人支气管上皮细胞周期和p53蛋白表达的影响

？目的:探讨泛素连接酶ring2对苯并[a]芘(bap)染毒人支气管上皮16hbe细胞周期和p53蛋白表达的影响。方法:以16hbe未处理组为阴性对照组,二甲基亚砜(dmso)组为溶剂对照组,mock组为序列对照组。在使用rna干扰技术降低16hbe细胞泛素连接酶ring2基因表达前后,分别采用不同浓度bap(1、2、4、8、16、32μmol/l)染毒24h;或16μmol/lbap染毒不同时间(1、2、4、8、12、24h)。用流式细胞术检测干扰前后两组细胞周期分布情况,用western-blot法检测干扰前后两组细胞p53蛋白表达水平。结果:流式细胞术检测结果显示,与阴性对照组比较,16hbe细胞染毒后各浓度和各时点组s期细胞所占的比例均增加(p<0.05),而16hbe(sirna-ring2)各浓度和各时点组s期细胞所占的比例均下降(p<0.05)。协方差分析显示分组因素(是否进行rnai)和染毒浓度都对s期细胞比例有影响(p均<0.01),16hbe(sirna-ring2)细胞组的修正均数(17.09%)比16hbe细胞组(31.55%)明显降低(p<0.01)。分组因素和染毒时间都对s期细胞比例有影响(p均<0.01),16hbe(sirna-ring2)细胞组的修正均数(13.07%)比16hbe细胞组(28.04%)明显下降(p<0.01)。western-blot结果显示,与阴性对照组比较,16hbe细胞染毒后各浓度和各时点组p53的表达水平均增加(p<0.05),而16hbe(sirna-ring2)细胞除16μmol/l染毒8h组外,其余各组p53的表达水平均降低(p<0.05)。协方差分析显示分组因素和染毒浓度都对p53的表达水平有影响,p值分别为0.026和0.028。16hbe(sirna-ring2)细胞组的修正均数(0.989)比16hbe细胞组(1.375)明显下降(p<0.05);分组因素和染毒时间都对p53的表达水平有影响,p值分别为0.007和0.035。16hbe(sirna-ring2)细胞组的修正均数(0.857)比16hbe细胞组(1.541)明显下降(p<0.05)。结论:ring2参与的组蛋白泛素化修饰可能通过影响p53表达和细胞周期s期的变化来发挥对dna损伤修复的调控。