贲门腺癌中smad4基因甲基化状态分析

？目的：探讨贲门腺癌(gastriccardiaadenocarcinoma，gca)中smad4(mothersagainstdecapentaplegichomolog4)基因启动子区及第1外显子区的甲基化状态及其与tgf-β1蛋白表达之间的相关性。方法：取110例贲门腺癌组织及相应癌旁组织，分别采用甲基化特异性pcr(methylationspecificpcr，msp)方法检测smad4基因的甲基化情况，rt-pcr方法检测smad4mrna水平，免疫组织化学法检测smad4和tgf-β1的蛋白表达情况。结果：贲门腺癌组织smad4基因启动子甲基化率为5.5%(6/110)，smad4基因第1外显子5'非翻译区的甲基化率为24.5%(27/110)，相应癌旁正常黏膜均未检测到此两个位点的甲基化，癌组织smad4基因甲基化率显著高于癌旁正常组织(p<0.05)，且贲门腺癌中smad4基因5'非翻译区发生甲基化的比率显著高于启动子区(p<0.01)。贲门腺癌组织中smad4mrna及蛋白表达显著低于癌旁正常组织(p<0.05)，其甲基化与蛋白表达之间呈负相关。tgf-β1在贲门癌组织中的表达(65.5%)明显高于相应癌旁组织(15.5%)(p<0.01)，且随肿瘤分期的增高和肿瘤分化程度的降低，tgf-β1的阳性表达率明显升高(p<0.05)。smad4蛋白和tgf-β1蛋白在贲门腺癌中的表达呈明显的负相关。结论：在贲门腺癌发生发展过程中smad4基因第1外显子的5'非翻译区比启动子区更易发生高甲基化而导致基因沉默，smad4甲基化及tgf-β1的过表达可能是贲门腺癌发生的机制之一。