tk基因突变试验-l5178y细胞与tk6细胞的比较研究

？tk基因突变试验是一种国外已广泛使用的体外短期致突变实验,它具有很高的灵敏度,可检出包括点突变、大的缺失、重组、染色体异倍性和其他较大范围基因组改变在内的多种遗传改变。tk基因突变试验采用的靶细胞系主要有小鼠淋巴瘤细胞l5178y以及人类淋巴母细胞tk6和wtk1等,其基因型均为tk+？-.。使用l5178y细胞的试验(即小鼠淋巴瘤细胞试验)发展较早,已形成一套比较完善的方法。而tk6和wtk1等人类来源的细胞在tk基因突变分析中的应用时间还不长,其方法尚不太成熟且资料有限,但因为来源于人类,在评价受试物对人体的损伤方面意义可能更大。有关小鼠淋巴瘤细胞和人类淋巴母细胞在tk基因突变试验中的灵敏度与特异性方面的比较性研究的报告尚不多见。本研究使用3种常规诱变剂(mms、ems、mmc)和一种非诱变剂(kcl),分别采用琼脂平皿法和微孔平板法对两种细胞(l5178y与tk6)的灵敏度和特异性进行比较研究。研究结果表明,直接比较同一受试物诱发两种细胞的突变频率,tk6细胞显著低于l5178y细胞。比较两种细胞的相对突变指数时,tk6细胞突变指数显著高于l5178y细胞。而且tk6细胞在较低浓度的受试物剂量下即可诱发突变频率、突变指数的显著增加。说明tk6细胞在本试验中比l5178y细胞敏感。两种细胞采用两种方法对4种受试物的致突变性评价结果一致,即3种强致突变剂的检测结果均为阳性;微孔法检测kcl的结果两种细胞均为阳性,而琼脂法的检测结果均为无反应。结论:使用tk6细胞和l5l78y细胞对4种受试物的检测结果基本一致,但tk6细胞在检测低毒性、低浓度受试物时优于l5178y细胞。另外,从对人类的实际意义来看,也应推广tk6细胞在tk基因突变分析中的应用。