基因转染法建立bcl-2稳定表达的肝癌细胞株

？目的与方法:为了建立稳定表达bcl-2蛋白的肝细胞癌(简称肝癌)细胞株,用脂质体介导的基因转染法将含有人bcl-2cdna的逆转录病毒表达载体pdor-sb质粒导入bcl-2蛋白阴性的肝癌细胞系hcc-9204细胞中。经g-418筛选后获得转入bcl-2基因的细胞克隆。细胞扩大培养后用免疫细胞化学法检测bcl-2表达情况。有限稀释法连续克隆化直至获得100%稳定表达bcl-2蛋白的单克隆细胞株,并进行流式细胞仪检测。结果:转染了pdor-sb的hcc-9204细胞大部分为bcl-2蛋白表达阳性,而转染了pdor空载体或未转染的hcc-9204细胞均为bcl-2蛋白阴性。经过连续3次克隆化后,流式细胞仪检测表明所获得的单克隆细胞株100%表达bcl-2蛋白。结论:用基因转染法成功地建立了稳定表达bcl-2蛋白的肝癌细胞株。