乙醇对小鼠胚胎脏层卵黄囊发育影响的体外研究

？背景与目的：探讨乙醇对小鼠胚胎脏层卵黄囊发育的影响及其与畸形发生的联系。材料与方法：将8.5dcd-1小鼠胚胎于含不同浓度乙醇的培养基中连续培养48h，乙醇染毒浓度分别为0、1.0、2.0和4.0mg/ml。培养结束后，于体视显微镜下对脏层卵黄囊和胚胎的形态发育进行评分；测定脏层卵黄囊和胚胎总蛋白和dna含量；he染色检测卵黄囊组织学改变；电镜下观察卵黄囊内皮细胞超微形态；半定量rt-pcr法检测一系列卵黄囊血管发育相关基因的表达情况。结果：乙醇染毒组卵黄囊直径、血管发育、卵黄囊总蛋白和总dna含量均较对照组降低，且呈现剂量-反应关系。卵黄囊发育障碍与胚胎发育迟缓及畸胎发生率存在相关关系。扫描电镜下可见卵黄囊内皮细胞表面微绒毛数量明显减少；透射电镜下可见内皮细胞吞噬活性降低，出现核固缩，发泡，线粒体肿胀等凋亡现象。血管发生相关的flk1和tie2基因在乙醇染毒组表达下降。结论：乙醇可能通过抑制器官发生期脏层卵黄囊的发育诱导胚胎畸形的发生。