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癌变·畸变·突变 1999
trap结合液体闪烁计数法半定量检测端粒酶活性Keywords: 端粒酶,定量分析,端粒重复序列扩增法,液体闪烁计数 Abstract: ?本文介绍一种端粒酶检测方法,该方法是将trap法在pcr过程中引入3h2dctp,结合液闪计数cpm半定量分析端粒酶活性。应用该方法检测端粒酶阳性的cne2细胞和部分组织标本及rnasea或加热预处理后的对照标本,并与trap法相比较,结果显示cne2细胞端粒酶阳性,10个cne2细胞中仍可检到端粒酶,组织样品的端粒酶与文献值基本一致;放射性活性计数(cpm)与cne2细胞抽提液中端粒酶活性具有良好的线性关系;用rnasea或加热处理后标本为阴性,cpm值接近阴性对照;批内和批间变异度分别为11.68%和20199%。该方法不需使用聚丙烯酰胺凝胶电泳(page)和放射自显影,简便快速,当天可观察结果,并具有灵敏度高、特异性和批内重复性好之特点。
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