外源dna转染精子的实验研究

？背景与目的：探索精子作为外源基因载体的可行性及阳离子脂质体的存在对精子转染率的影响。材料与方法：取性成熟雄性金黄地鼠附睾内精子，采用共培养及脂质体介导两种方法与外源dna共孵育后，用pcr、southernblot及荧光原位杂交(fish)等技术检测外源基因在精子细胞中的存在及存在部位，并对两种方法进行比较分析。结果：金黄地鼠附睾内的活精子具有主动捕获外源基因的能力，荧光原位杂交证明部分外源基因进入了精子头部，脂质体介导组精子外源基因携带率较共培养组高，两组精子用dna酶处理前后外源基因携带率间差异也有统计学意义，且观察发现死精子经洗涤后没有携带外源基因者。结论：即是在没有脂质体存在的情况下，活的精子细胞仍然能被外源基因所转染，这一过程涉及到精子对外源基因的主动性捕获，脂质体的存在能提高精子外源基因的转染率。