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癌变·畸变·突变 2005
卵母细胞带的hbvna在小鼠期胚胎中的制与表达Keywords: 乙型肝炎病毒dna,复制与表达,卵母细胞,小鼠胚胎 Abstract: ?背景与目的:研究卵母细胞携带的乙肝病毒(hepatitisbvirus,hbv)dna能否在小鼠早期胚胎中复制与表达,为hbv经卵垂直传播提供科学证据。材料与方法:手术暴露昆明小鼠卵巢,将pbr322-hbv重组质粒dna注射到昆明小鼠卵巢内,1个动情周期(4d)后进行超排卵并与正常雄性小鼠合笼,收集二细胞胚,用荧光原位杂交(fluorescenceinsituhybridization,fish)检测hbv在早期胚胎内的整合和复制;用逆转录聚含酶链反应(reversetranscriptase-polymerasechainreaction,rt-pcr)和免疫荧光试验检测hbv基因在早期胚胎的表达。结果:fish在小鼠二细胞胚细胞核上检测到hbvdna阳性杂交信号,rt-pcr和免疫荧光试验在二细胞胚内检测到hbxmrna和hbsag。结论:hbvdna进入雌性生殖细胞后,可以整合到宿主基因组内,通过自然受精随卵母细胞进入胚胎,并能在胚胎中复制与表达。提示hbv有可能通过雌性生殖细胞进行垂直传递。
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