p53基因249编码子突变对p53功能的影响

？背景与目的：研究p53基因249编码子突变对p53基因功能的影响。材料与方法：利用基因打靶技术在小鼠胚胎干细胞(es)p53基因249编码子中引入点突变，使编码子249由精氨酸(arg)变成丝氨酸(ser)，然后将含突变的es细胞显微注射到hprt-/-小鼠囊胚中，将注射过的囊胚植入假孕的雌性小鼠子宫，到第14d取小鼠胚胎纤维母细胞(ef)，用含hat的培养液筛选出从es细胞分化而成的鼠ef细胞，经测序证实细胞含有由249arg到ser的突变。用不同剂量的电离辐射(ir)或紫外光(uv)分别照射es或ef细胞，然后利用流式细胞仪检测该突变对小鼠es细胞周期及对es和ef细胞凋亡的影响，并利用westernblot检测相关蛋白的表达。结果：用ir处理es细胞后，含p53基因249编码子突变的es细胞对ir诱导的g1/g0细胞周期阻滞作用减弱(p0.05)；但其bax和p21的表达，较含野生型p53的细胞表达减少(p<0.05)。结论：p53基因249编码子突变可减弱p53在细胞周期阻滞和凋亡中的作用，但对p53的表达无明显影响。