人cox-2基因反义真核表达载体的构建及对sgc-7901细胞增殖的影响

？背景与目的：构建人cox-2基因反义真核表达载体,研究cox-2基因对人胃癌细胞株sgc-7901增殖的影响。材料与方法：采用分子克隆技术,用ecorⅰ从含人全长cox-2基因的质粒pbosneocox-2中切下含cox-2cdna的目的片段,然后分别在其两端添加ecorⅰ和bglii酶切位点,酶切后将该片段按正、反两个方向插入真核表达载体pires2-egfp的多克隆位点中,琼脂糖凝胶电泳法对重组子进行鉴定，脂质体法将重组质粒转染到人胃癌细胞株sgc-7901中,mtt法检测转染反义cox-2基因的表达载体后sgc-7901细胞增殖的变化。结果：经酶切鉴定,正、反义目的片段成功地连接到pires2-egfp中，cox-2基因正、反义真核表达载体成功构建,转染后在sgc-7901细胞中稳定表达，反义cox-2基因真核表达载体转染sgc-7901细胞后能抑制其增殖。结论:成功构建人cox-2基因反义真核表达载体,反义cox-2基因能抑制sgc-7901细胞增殖。