tnf家族的新成员trailcdna的克隆及其在e.coli中的表达

？目的:克隆trail基因cdna全长,构建trail的原核表达载体,从而建立其原核表达体系。方法:通过抽提外周血淋巴细胞总rna进行rt-pcr克隆trailcdna,构建trail的原核表达载体,用限制性酶切和dna测序进行鉴定,以温度进行诱导表达,通过sds-page分析表达产物。结果:(1)克隆了trail基因cdna全长,dna测序结果与报道的完全一致;(2)构建了trail基因原核表达载体;(3)将构建好的载体转化相应的宿主菌,诱导后得到了trail蛋白表达产物。结论:trail基因cdna的克隆将对于其抗肿瘤作用研究有重要意义,同时此基因原核表达系统的建立为其在肿瘤生物治疗中的应用奠定了基础。