免疫杀手细胞的体外扩增方法及其对肝癌细胞bel-7402的杀伤作用

？目的：探讨免疫杀手细胞(immune-killercells，ikcs)的体外扩增方法及其对人肝癌细胞bel-7402的杀伤作用。方法：改良自然杀伤细胞培养扩增法扩增ikcs细胞，流式细胞仪分析ikcs表型，台盼蓝染色计数法观察细胞增殖状况，alamarblue法观察ikcs细胞对bel-7402细胞的杀伤作用，用balb/c裸鼠模型检测ikcs细胞对肝癌动物模型的治疗作用。结果：ikcs细胞培养14d的细胞总数扩增300倍以上，主要由cd3+cd56+、cd3-cd56+和cd8+细胞亚群组成，cd3+cd56+和cd3-cd56+比例达85%以上，cd8+比例达到77%以上。ikcs细胞对肝癌bel-7402细胞的杀伤实验显示，当效靶比为25∶1时和100∶1时，其杀伤活性分别为66.5%和97.8%(p＜0.01)。裸鼠肝瘤模型治疗实验显示，ikcs细胞对早期和晚期人肝癌bel-7402细胞裸鼠模型均有显著的治疗作用，与对照组比较，其抑瘤率达69%以上(p＜0.01)。结论：本实验建立的肿瘤免疫杀手细胞ikcs的培养扩增方法是可行的、有效的，有望成为一种新的肿瘤免疫细胞治疗方法。