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癌变·畸变·突变 2012
1,4-苯醌致人胚肺成纤维细胞的凋亡效应与调控机制Keywords: 4-苯醌,helf细胞,细胞凋亡,bax/bcl-2,p53 Abstract: ?目的:研究1,4-苯醌(1,4-benzoquinone,pbq)对人胚肺成纤维细胞(humanembryoniclungfibroblast,helf)的凋亡效应与调控机制。方法:分别用不同浓度(10、20、40、60、80μmol/l)的pbq处理helf细胞24h和40μmol/lpbq处理helf细胞24、48、72h后,应用噻唑蓝(mtt)比色法检测pbq对helf细胞增殖的抑制作用,以pi单染法检测细胞周期的改变,用annexin-ⅴ/pi双染法检测细胞凋亡,以实时荧光pcr法检测bax、bcl-2、p53mrna表达水平的改变。结果:与对照组相比,不同pbq染毒浓度下作用24h后,随pbq浓度增加,细胞相对增殖率显著下降(p<0.05),g0/g1期细胞下降(在40和60μmol/l时,p<0.05),s期细胞增加(p<0.05),以40μmol/lpbq浓度作用于helf细胞不同时间,随着染毒时间的增加其相对增殖率和s期细胞均下降(p<0.05),而g0/g1期细胞随着染毒时间的增加呈上升趋势(p<0.05);当染毒浓度大于20μmol/l时,染毒24h可诱导helf细胞产生凋亡,凋亡率随着染毒时间的增加而上升,与对照组相比差异具有统计学意义(p<0.05);不同浓度的pbq染毒24h,细胞的bax、bcl-2、p53mrna表达水平均上调。40μmol/lpbq作用不同时间后,bax、p53mrna水平随着染毒时间的增加而上升,与对照组相比差异均具有统计学意义(p均<0.05);bcl-2随染毒时间增加而下降,48和72h时与对照组相比差异具有统计学意义(p<0.05);bax/bcl-2比值随染毒时间增加而增加,与对照组相比差异具有统计学意义(p<0.05)。结论:pbq能抑制helf细胞增殖,影响helf细胞周期分布,诱导细胞发生凋亡,其凋亡机制可能与bax/bcl-2比值的上升,及p53mrna表达的上调有关。
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