应用pcr法检测微生物类农药木霉菌可湿性粉剂急性经口致病性

？目的：应用pcr法检测微生物类农药木霉菌可湿性粉剂的急性经口致病性，探讨pcr法在微生物类农药经口致病性研究中的应用。方法：wistar大鼠共56只，分成对照组和染毒组，每组28只，雌雄各半。选用微生物农药木霉菌可湿性粉剂为受试样品，染毒组每只大鼠按108个孢子经口灌胃，对照组灌胃等量生理盐水。于染毒后第1、7、14、21天收集动物粪便，同时剖解动物的肾脏、心脏和肝脏等组织提取dna，利用木霉菌特异性引物进行pcr扩增，检测受试物目的基因的表达，以观察受试微生物农药的感染性、持久性。并记录观察期内动物的中毒症状、死亡情况、体质量，对死亡动物进行大体解剖并进行病理组织学检查，以判断其致病性。结果：染毒后仅从第1天染毒大鼠的粪便中提取的dna，经pcr检测可见木霉菌目的基因扩增条带，染毒后第7天及以后粪便中均未见目的基因表达，其余各脏器提取的dna，经pcr扩增后亦均未见目的基因表达。动物染毒后，未见明显中毒表现，观察期内无动物死亡，大体检查及病理检查均未见明显异常。结论：木霉菌可湿性粉剂经口灌胃进入动物体内后仅在胃肠道内短期存在，并逐渐被清除掉，并未透过胃和肠道而侵染进入动物的组织、器官中。微生物农药木霉菌可湿性粉经口染毒后对大鼠无致病性。应用pcr可有效检测出受试物的清除情况，且具有较好的特异性，可作为微生物农药经口致病性的检测方法。