熊果酸对小鼠h22移植瘤的抑制作用研究

？目的：观察熊果酸(ursolicacid，ua)对小鼠h22移植瘤的抑制作用并对其机制进行探讨。方法：将75只昆明种小鼠于左前腋下皮下接种h22肝癌细胞，24h后随机分为5组，每组15只，模型组、环磷酰胺(cyclophosphamide，cp)对照组[25mg/(kg·d)]和ua低、中、高剂量药物组[50、100、150mg/(kg·d)]。ua各剂量组和cp对照组分别以相应剂量ua和cp灌胃，模型组以等体积花生油灌胃，每天灌胃1次，连续给药2周。末次给药24h后，称小鼠体质量，摘除眼球取血后处死。无菌条件下完整剥离小鼠肿瘤及肝、肾、脾组织，计算抑瘤率及肝、肾、脾指数；he染色观察肿瘤组织病理学改变；分离脾淋巴细胞，cck8法测定小鼠脾淋巴细胞增殖活性；免疫组化法检测肿瘤组织中cd4+、cd8+t细胞亚群的分布情况，计数cd4+t细胞和cd8+t细胞个数。并采用酶联免疫吸附法(elisa)检测血清中白细胞介素12(interleukin-12，il-12)的浓度。结果：ua各剂量组小鼠h22肿瘤质量增长均较缓慢，其中ua中、高剂量组肿瘤质量明显减小，与模型组比较，差异均具有统计学意义(p<0.05)；ua中、高剂量组抑瘤率分别为30.15%和39.80%。ua各剂量组肝、肾指数与模型组比较差异无统计学意义(p>0.05)，而脾指数则随ua剂量增加逐渐升高，其中，ua中、高剂量组脾指数与模型组比较差异具有统计学意义(p<0.05)。he染色病理观察结果显示，模型组肿瘤细胞生长旺盛，细胞体积较大，胞质丰富，少见坏死区域；ua干预组肿瘤组织中瘤细胞生长增殖明显受到抑制，肿瘤细胞数量减少，密度降低，排列稀疏，细胞核固缩深染或破裂，细胞间质较多，核浆比例减少，坏死区域明显增多。cck8实验结果显示，随着ua剂量增加，脾淋巴细胞增殖活性逐渐升高，其中，ua中、高剂量组脾淋巴细胞增殖活性显著升高，与模型组间的差异具有统计学意义(p<0.05)。免疫组化结果显示，ua中、高剂量组肿瘤组织中cd4+、cd8+t细胞个数与模型组比较均明显增加，差异具有统计学意义(p<0.05)。ua高、中、低剂量组血清中il-12的含量均较模型组升高，差异均有统计学意义(p<0.05)；ua高剂量组与cp对照组相比亦显著升高(p<0.05)。结论：一定剂量ua可抑制h22荷瘤小鼠肿瘤生长，其作用机制可能与ua促进机体免疫器官发育和淋巴细胞增殖，增加cd4+、cd8+t细胞向肿瘤组织浸润，并提高血清中il-12等抗肿瘤活性细胞因子的浓度诱导细胞免疫有关。