慢病毒介异的孕烷x受体sh-rna稳定干扰hepg2细胞株的构建

？目的：构建慢病毒介导的人孕烷x受体(hpxr)sh-rna干扰载体及筛选肝癌细胞稳定干扰株。方法：针对hpxr的特异性序列，设计干扰序列，构建重组克隆。转染hek293t细胞，筛选有效干扰片段。hek293t包装干扰病毒并转染肝癌hepg2细胞株，200mmol/l嘌呤霉素筛选2－3周，westernblot检测pxr表达。hpxr激动剂利福平处理pxrsh-rna稳定干扰肝癌hepg2细胞株和scramble对照细胞，抽提rna并鉴定hpxr靶基因细胞色素p4503a4(cyp3a4)的表达。结果：筛选出了pxr有效干扰片段，并获得了pxr信号通路有效敲低的hepg2慢病毒稳定干扰株。结论：成功构建了慢病毒介导的pxrsh-rna稳定干扰hepg2细胞株。