甲基磺酸甲酯诱发wtk1细胞tk位点突变试验方法的建立

？目的：建立wtk1细胞tk基因突变试验方法，为毒理学评价和机制的研究提供实验依据。方法：用标准诱变剂甲基磺酸甲酯(mms)处理wtk1细胞，检测tk位点突变率和细胞p53基因蛋白表达水平的改变。结果：mms可诱导wtk1细胞tk位点突变率增加，mms的处理剂量达到10mg？l-1时，tk位点突变率为985.2/106个细胞，并有剂量反应关系。诱发突变率约是自发突变率3～10倍。在tk位点诱发了两种不同表型的突变集落，即正常生长突变体(tk-ngmutant)和慢生长突变体(tk-sgmutant)，但以慢生长突变体为主。mms处理后，wtk1细胞p53蛋白的表达水平增高。结论：mms可以诱发wtk1细胞tk位点的突变率增加，mms处理细胞后，p53蛋白的表达水平增高，说明wtk1细胞的p53蛋白的功能尚未丧失。该方法的建立，为进一步开展tk基因突变试验，评价环境化学物的诱变性奠定了基础。