rt－pcr联合一步法扩增g蛋白α亚基基因的开放阅读框

？报道逆转录-多聚酶链式反应(rt-pcr)联合一步程序,扩增大于1kb的拟南芥菜g蛋白α亚基基因的开放阅读框。该程序中,当rna模板和引物变性,并在同一管中加入pcr缓冲液、4种dntp底物、逆转录酶和taqdna聚合酶之后,就不需其它手工操作步骤,因而可同时进行大批量样品的操作。实验结果证明amv(鸟类骨髓性白血病病毒)逆转录酶对taqdna聚合酶的活性没有抑制作用。这种rt-pcr联合一步法可从0.5μg的总rna中快速地扩增长于1.0kb的cdna片段。