一个推测的拟南芥漆酶基因在巴斯德毕赤酵母中的表达

？at5g01040基因是一个推测的拟南芥漆酶基因。根据其编码序列设计引物,利用rt-pcr方法扩增出1755bp的片段。测序结果表明,该片段存在3个突变位点,其中一个突变位点改变了所编码的氨基酸。将该片段克隆到表达载体ppiczab上,电击转化毕赤酵母。经筛选获得80个候选重组菌株,其中18个菌株的培养液中存在漆酶活性,说明所克隆的基因在毕赤酵母中实现了分泌表达,证实了at5g01040编码的蛋白具有漆酶活性。