褐飞虱诱导的水稻cdna文库的构建及锌指蛋白基因的分离

？从褐飞虱取食48h后的水稻幼苗中提取总rna并纯化出mrna,经反转录合成第一、二链cdna,去除小于400bp的cdna片断后,连接ecori人工接头,与去磷酸化的噬菌体长短臂连接,体外包装后感染,成功构建了含1.1×106重组子的褐飞虱诱导的水稻cdna表达文库,重组子平均外源片断为1.5kb,扩增后的cdna文库滴度为1.1×1011pfu/ml,适用于筛选低丰度mrna的cdna克隆。将已筛选得到的estbphiw001为探针,在褐飞虱诱导的水稻cdna文库中筛选得到1.4kb的全长锌指蛋白基因,命名为osbi2。northernblot分析说明此基因可能在水稻对褐飞虱的防卫反应中起作用。