小麦面粉puroindoline蛋白的提取与纯化

？puroindoline蛋白是小麦面粉中一种非常重要的蛋白质,不仅影响和决定了籽粒的硬度,而且有抗g+、g-菌以及抗真菌的作用。用含4%tritonx-114、100mmol/lph7.8tris-hcl缓冲液处理小麦面粉来分离puroindo-line蛋白,经处理后得到的蛋白质混合溶液首先用分子筛葡聚糖g-75纯化,每个收集管内的组分经sds-page分析,分子量小于31kd的蛋白质组分被回收和集中,回收的蛋白质组分经peg20000浓缩后,再用离子交换柱羧甲基纤维素(cm-23)进行纯化。其洗脱液分别是双蒸水和nacl,梯度为0.05~0.7mol/l、8mmol/lph5.5的mes缓冲液,回收只含15kd的蛋白质的组分,接着用peg20000浓缩,最后冷冻干燥得到puroindoline蛋白。