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植物学学报 2009
dre顺式作用元件dsdna芯片制备Keywords: dre顺式作用元件,dreb转录因子,双链dna芯片 Abstract: ?dre顺式作用元件能与dreb转录因子特异结合,在诱导逆境(干旱、高盐、低温)基因表达过程中起重要作用。dsdna(doublestranddna)微阵列芯片技术能够有效地检测序列特异性dna结合蛋白质(转录因子)与大量dna靶点(顺式作用元件)的特异性结合,可有效分析生物分子结合作用。根据dre顺式作用元件核心序列设计并化学合成含发夹结构的单链dna探针,采用taqdna聚合酶在片延伸,并对其在片延伸体系的反应温度、mg2+浓度以及单链探针是否变性等条件进行了优化。结果表明,50℃的反应温度,2.5mmol/l的mg2+浓度和单链不变性是taqdna聚合酶在片延伸的最佳条件。优化方法制备的dsdna芯片将更有利于dre顺式作用元件与dreb抗逆转录因子相互作用的研究。
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