rt-pcr方法同步检测兰州百合(liliumdavidiivar.unicolor)两种主要病毒

？建立并优化了以18srrna为内参照的特异性检测兰州百合(liliumdavidiivar.unicolor)两种主要病毒:黄瓜花叶病毒(cucumbermosaicvirus,cmv)和百合无症病毒(lilysymptomlessvirus,lsv)的三重rt-pcr体系。结果表明,52.5°c的退火温度、0.025u/μl的taqdna聚合酶、0.6mmol/l的dntp浓度、4mmol/l的mg2+浓度、0.4μmol/l的各引物浓度以及30个循环等是三重pcr体系扩增的最佳条件;同时用该优化体系检测了兰州百合不同取样部位的病毒差异,发现lsv在不同取样部位的特异扩增条带的强度比较一致,而cmv差距相对较大,外鳞片cmv相对含量在整个感病植株中最高。为兰州百合主要病毒检测、脱毒组培快繁提供了技术支撑。