高亲和k+转运载体sshkt1的抗体制备及表达分析

？利用rt-pcr及race技术从盐生植物盐地碱蓬(suaedasalsal.)根中克隆了高亲和k+转运载体ssh-kt1的基因。以sshkt1基因的cdna为模板,扩增了cdna中的亲水片段(403~612bp),连接至原核表达载体pgex-6p-3中并转化大肠杆菌bl21(de3),iptg诱导表达了融合蛋白。该蛋白主要以包涵体的形式存在,纯化后免疫新西兰兔,得到了特异性较高的sshkt1多克隆抗体。利用此抗体进行了westernblot分析,表明sshkt1可能主要存在于质膜上。进一步研究了k+饥饿及盐胁迫条件下sshkt1蛋白表达量的变化,结果表明k+饥饿及盐胁迫条件下sshkt1的表达量都明显增加,表明sshkt1在盐地碱蓬k+吸收特别是高盐条件下k+营养中有重要作用。