|
植物学学报 2006
利用转基因标记nptⅱ快速、规模化纯合转基因番茄Keywords: nptⅱ,卡那霉素,多重pcr,转基因番茄,遗传分析 Abstract: ?利用卡那霉素喷施方法对带有nptⅱ标记基因和双价外源基因(烟草渗调蛋白基因ap24和菜豆几丁质酶基因chi)的转基因番茄的3个世代在温室或田间环境进行规模化筛选,成功获得8个单拷贝转基因纯合植株。含有单个拷贝nptⅱ标记基因的转基因株系后代,对卡那霉素的抗感分离符合3:1的孟德尔分离比例,t2代中一些株系表现为对卡那霉素全抗,表明这些株系的外源基因已经纯合,这一结果在t3代中进一步得到证实。但对于含有两个拷贝外源基因的转基因株系,外源基因的遗传则比较复杂。同时,结合km喷施和多重pcr技术对外源基因的异常遗传进行了初步分析。用pcr分析进一步证实了该方法的准确性,该方法是对转基因番茄进行大规模、快速遗传分析的理想方法。
|