藻胆蛋白apce缺失突变体的自催化重组研究

？采用聚合酶链式反应(pcr)扩增出anabaena.sppcc7120别藻蓝蛋白apce(1-240)的一系列缺失突变体基因:apce(14-240)、apce(25-240)、apce(63-240)、apce(85-240)、apce(121-240)、apce(133-240)、apce(187-240),在大肠杆菌中高效表达分别获得相对应的缺失突变体蛋白。对上述脱辅基蛋白与藻蓝胆素(pcb)的体外自催化重组进行了研究。结果表明:在含有4mol/l尿素的磷酸钾缓冲体系中,apce(25-240)脱辅基蛋白可与藻蓝胆素体外重组实现共价连接,获得的色素蛋白质具有最大吸收峰(λmax=656nm)和荧光发射峰(λmax=670nm),其余6个缺失突变体蛋白仅能与藻蓝胆素非共价连接,不能发生自催化重组。该结果为进一步研究连接多肽apce的结构和功能提供了信息,具有重要意义。