海栖热袍菌耐高温β-甘露糖苷酶基因的克隆及表达

摘要以海栖热袍菌(thermotogamaritima)msb8基因组dna为模板，克隆得到β？甘露糖苷酶基因(man2).测序分析表明，该基因全序列为2358bp，编码785个氨基酸，分子量约为92×103.根据蛋白质氨基酸的同源性分析，该β？甘露糖苷酶与新阿波罗栖热袍菌(thermotoganeapolitana)man2(accessionno.aak52304.1)的同源性最大，达到80%.将此基因连接至表达载体pet？28a(+)并转化到大肠杆菌bl21细胞中，经iptg诱导，β？甘露糖苷酶活力达5.96u/ml.粗酶的温度稳定性分析表明，该酶的热稳定性好，90℃处理10min，活力回收率65%，具有重要的工业应用前景.图3表1参17