不同来源的苏云金芽孢杆菌aiia基因表达及其抗病性分析

摘要苏云金芽孢杆菌(bacillusthuringiensis,bt)aiia基因所编码的aiia蛋白是一种内酯酶，可以降解n？乙酰高丝氨酸内酯(n？acyl？homoserinelactones,ahls)，从而减弱致病菌产生的危害．本研究克隆了6株不同来源的苏云金芽孢杆菌aiia基因，并对来自于苔藓(llb15)和土壤(lls9)的btaiia基因进行了生物信息学分析．结果表明,aiia？b15分子量为27？97×103，等电点为4.59；aiia？s9分子量为28？14×103，等电点为4？32，两者都是亲水性蛋白．aiia蛋白具有很高的保守性,aiia？b15和aiia？s9同源性为90%．进化树结果表明,aiia？b15与bacillusthuringiensissubsp.kyushuensis进化距离最近,aiia？s9与bacilluscereus进化距离最近．将aiia？b15基因克隆到pgex？4t？3表达载体中，构建重组质粒pgexaiia？b15,iptg诱导后可大量表达融合蛋白．对表达的条件进行优化．结果表明,0？6mmol/liptg,30℃下诱导3h为最佳诱导条件．致病性检测表明，该融合蛋白对胡萝卜欧文氏软腐病菌具有较强的抗病作用．图13表4参23