菲降解菌的筛选鉴定及其降解酶基因的研究

摘要经过富集从活性污泥中筛选出两株菲降解菌wscii和wsciii，经16srdna鉴定，它们分别属于鞘氨醇单胞菌属(sphingomonassp.)和假单胞菌属(pseudomonassp.)，在28℃下4d内对菲（0.6g/l）的降解率分别达到了70.9%和78.1%；在lb、萘和菲为碳源的培养条件下，测得菌体的双加氧酶比活力不同.在菲的诱导下，两株菌的双加氧酶比活力最高，而以lb和萘为碳源时酶的比活力较低，其中wscii在萘中不能生长；这表明该酶在两菌中皆为底物诱导表达.以其它菌的萘双加氧酶基因大亚基片段做模板制备异源探针，与两菌总dna进行斑点杂交；结果表明，这两株菌可能含有不同的菲双加氧酶基因.利用简并引物进行pcr扩增菲双加氧酶，结果仅能从wsciii的总dna中扩增得到目的片段，序列分析证明，该基因与已报道的(p.putidancib9816-4,af491307)双加氧酶同源性最高为98％.图5参10