发根农杆菌转化海边香豌豆及转化体的体细胞胚胎发生

摘要将海边香豌豆无菌苗的子叶和下胚轴切段在附加ρ(2,4？d)=1mgl-1,ρ(6ba)=0.5mgl-1的ms培养基上预培养3d，然后与发根农杆菌a4菌液共培养30min.洗涤之后，在附加羧苄青霉素的无激素的ms培养基上培养.7~10d后，外植体切面处长出许多毛状根.继代培养时生长旺盛，且产生许多侧根和分枝.毛状根的诱导频率与无菌苗培养天数和外植体来源部位有关.子叶切块的诱导率明显高于下胚轴.16d龄无菌苗的子叶切块诱导毛状根的频率最高.乙酰丁香酮处理菌液可以有效提高子叶外植体的毛状根诱导频率.将毛状根切段培养在含有ρ(2,4？d)=1.0mgl-1的ms培养基上可诱导出愈伤组织.该种愈伤组织转移到含有ρ(2,4？d)=0.3mgl-1的ms培养基上培养时，诱导出了许多早期体细胞胚.检测的转化组织均含有农杆碱和甘露碱.图2表1参19