解淀粉芽孢杆菌dc-4豆豉溶栓酶成熟肽编码序列的克隆及表达

摘要利用pcr方法从解淀粉芽孢杆菌dc？4总dna中扩增出豆豉溶栓酶（dfe）成熟肽编码区片段.测序结果表明：dfe成熟肽编码区长825bp，编码275个氨基酸残基，分子量为27.7×103，推导的n'-端氨基酸序列与豆豉溶栓酶n'-端氨基酸测序结果完全一致，说明克隆到的基因确实是豆豉溶栓酶基因.同源性分析表明，dfe成熟肽编码区的核苷酸和氨基酸序列与日本纳豆激酶的同源性分别为80.0%和86.5%，这提示豆豉溶栓酶可能是一种新型的溶栓酶.将表达质粒pet？nde转化e.colibl21(de3)中，iptg可诱导表达大量的dfe融合蛋白，占菌体可溶性蛋白的40%，主要以包涵体的形式存在.图3表1参19