含发光酶基因的转座子质粒载体的改造及向根瘤菌hn01的转座
, PP. 252-257
Keywords: 发光酶基因,大豆根瘤菌,标记根瘤菌
Abstract:
将从自杀性重组质粒pdb30上分离的3.6kb含卡那霉素抗性基因和发光酶基因(luxab)的bglⅱ酶切片段,克隆到小mr的高拷贝质粒pij2925上,构成新的质粒,phnlx1011;然后将phnlx1011经bglⅱ部分酶切,酶连在含蔗糖酶基因(sacb)的自杀性重组质粒载体pmh1701上,载体分别采用bglⅱ酶切和bamhⅰ酶切.连接转化后共得到4种重组质粒类型的菌株,它们具有不同发光活性;将它们分别与快生型大豆根瘤菌hn01进行三亲本杂交,发现它们的转座频率均较pdb30高.对经转座标记后的根瘤菌进行发光活性检测,只有phnc3质粒所转座的根瘤菌浇具有较强发光活性.所得发光根瘤菌衍生菌株能在野大豆和栽培大豆黑农39根际形成正常根瘤,能用x光片记录下根瘤的发光活性.
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