两株抗乙酰羟酸合酶类除草剂克雷伯氏菌的分离及其ahas基因ilvih的克隆*

乙酰羟酸合酶(ahas)是磺酰脲类、咪唑啉酮类、三唑嘧啶类、磺酰胺类和嘧啶水杨酸类等乙酰羟酸合酶抑制剂类除草剂的作用靶标，获得能抗此类除草剂的ahas突变基因资源具有非常重要的理论和应用价值.本文从长期使用磺酰脲类除草剂的农田土壤中分离到2株抗性细菌hr9和hr11，根据其表型特征、生理生化特性和16srdna序列系统发育分析，初步鉴定为克雷伯氏菌(klebsiellasp.).菌株hr9和hr11对甲磺隆的最高耐受浓度分别达到9600μmol/l和8200μmol/l，且对各种乙酰羟酸合酶抑制剂类除草剂具有交叉抗性.利用pcr技术从hr9、hr11和实验室保存的一株除草剂敏感型克雷伯氏菌lb-2的总dna中克隆到编码ahas的基因ilvih，其中ilvi编码大亚基即催化亚基，ilvh编码小亚基即调节亚基.比对结果表明，菌株hr11与菌株hr9的ilvi有6个位点的氨基酸存在差异，hr9、hr11与lb-2的ilvi各有20和16个位点的氨基酸存在差异.图4表1参20